Анализ кала на наличие хеликобактер пилори. Где и как сдавать анализ на Хеликобактер пилори? Анализ кала на антиген хеликобактер пилори пцр

Классификация методов выявления инфекции Нelicobacter pylori представлена в таблице.

Инвазивные методы требуют проведения эндоскопического исследования (ФЭГДС) с биопсией и дальнейшим изучением гастробиоптатов. Неинвазивные методы эндоскопического исследования не требуют.

Гистологический метод

Гистологический метод исследования биоптатов СОЖ — микроскопия окрашенных различными способами (гематоксилин-эозином, по Гимзе, толуидиновым синим, по Вартину-Старри) мазков-отпечатков гастробиоптатов. Этот метод позволяет определить выраженность воспаления СОЖ, наличие атрофии, кишечной метаплазии и наличие (степень обсемененности) НР.

Быстрый уреазный тест (Хелпил-тест)

Быстрый уреазный тест (Хелпил-тест) — определение HР по уреазной активности микроорганизма в биоптатах СОЖ. Helicobacter pylori продуцирует уреазу, под влиянием которой происходит гидролиз мочевины с образованием иона аммония. При этом увеличивается рН среды, что можно зафиксировать с помощью изменения цвета индикатора. Гастробиоптаты помещают в раствор, содержащий мочевину и индикатор, изменение цвета которого косвенно свидетельствует о наличии HР.

Молекулярно-генетический метод — ПЦР в биоптате

Молекулярно-генетический метод исследования биоптатов СОЖ с помощью ПЦР позволяет выделять высокопатогенные и низкопатогенные штаммы HР.

Бактериологический метод

Бактериологический метод исследования биоптатов СОЖ: культуральное исследование и определение чувствительности HР к антибиотикам перед терапией первой линии важно проводить в регионах с высокой резистентностью к кларитромицину (более 15-20%), если планируется использовать стандартную трехкомпонентную эрадикационную терапию, одним из компонентов которой является кларитромицин. Бактериологический метод с определением чувствительности к антибиотикам также необходимо применять при неэффективности эрадикационной терапии второй линии.

Исследование кала на наличие антигена HР (ИФА)

ИФА (особенно с применением моноклональных антител) выявления антигена HР в кале является высокочувствительным и специфическим методом как для первичной диагностики инфекции НР, так и для контроля результата лечения.

Серологический метод

Серологический метод (ИФА) — определение антител IgG к HР в сыворотке крови — простой и доступный метод первичного скрининга инфекции. Учитывая, что антитела к HР сохраняются в течение многих месяцев после эрадикации микроорганизма, использование серологического метода не рекомендуется для оценки эффективности проведения эрадикационной терапии.

Уреазный дыхательный тест с 13С-мочевиной

Уреазный дыхательный тест — исследование состава выдыхаемого воздуха после приема раствора мочевины, меченной изотопом углерода (13С). При наличие в желудке обследуемого HР мочевина под действием уреазы, продуцируемой бактерией, подвергается гидролизу до NH4+ и HCO3- с последующим образованием из HCO3- углекислого газа, который, попадая в кровоток, затем выделяется через легкие и может быть определен спектрометром в выдыхаемом воздухе. Этот тест может использоваться как для первичной диагностики HР, так и для оценки эффективности эрадикации.

На фоне инфекции Helicobacter pylori развиваются такие воспалительные заболевания желудочно-кишечного тракта, как язва желудка или двенадцатиперстной кишки, эрозивный гастрит, гастродуоденит.

Частые недомогания со стороны пищеварительного тракта, такие как изжога, отрыжка, тяжесть в животе после еды или тошнота, могут свидетельствовать о присутствии в организме Хеликобактер Пилори (Helicobacter pylori). Жизнедеятельность болезнетворного агента в желудке и двенадцатиперстной кишке вызывает серьезные заболевания, которые требуют длительного и дорогостоящего лечения.

Для того, чтобы избежать нежелательных последствий, необходимо своевременно выявлять и обезвреживать опасного врага. В медицинских учреждениях можно сделать анализ кала на Хеликобактер Пилори и таким образом удостовериться в наличии или отсутствии инфекции.

Что представляет собой хеликобактерия

Микробы не могут жить и размножаться в кислой среде желудка, так как их тела не защищены от действия соляной кислоты. Хеликобактер Пилори является исключением из правил. Для жизнедеятельности бактерии нужна именно кислая среда, поэтому она не живет в кишечнике, как большинство видов грамотрицательных патогенов. Более того, в кишечном тракте мало кислорода, много разрушающих ферментов поджелудочной железы и желчи, что неблагоприятно сказывается на жизнеспособности микроорганизма.

Бактерия выделяет особый фермент — уреазу. Наличие этого фермента в желудке, а соответственно и хеликобактерию, можно быстро выявить с помощью уреазного теста. Он выполняется в момент проведения гастроскопии и позволяет получить достоверный результат в течение нескольких минут. Кал на Хеликобактер Пилори изучается более длительное время, но такой анализ имеет свои преимущества.

Коварство патогена заключается в том, что он незаметно разрушает органы изнутри. После заражения организма отсутствует какая-либо симптоматика, указывающая на инфекцию. Все негативные явления возникают лишь тогда, когда в желудке или двенадцатиперстной кишке развиваются болезни — гастрит, дуоденит, язва.

Другой неприятной особенностью микроорганизма является его способность трансформироваться в кокковую (шарообразную) форму, напоминающую споры. Это происходит в том случае, если патоген попадает в неблагоприятную среду, например, в момент терапии антибиотиками. В таком состоянии бактерия становится менее уязвимой и способна надолго затаиться в организме.

Хеликобактер Пилори считается одной из самых распространенных инфекций у людей. Чаще всего ее диагностируют у пациентов старше сорока лет. Люди могут быть носителями бактерии и даже не догадываться об этом из-за отсутствия симптомов. Не всегда носительство представляет серьезную угрозу для здоровья, однако при любом гастроэнтерологическом заболевании делаются анализы кала или крови на выявление Хеликобактер Пилори.

Медицинское обследование стоит пройти при наличии следующей симптоматики:

• частой изжоги, отрыжки;
• регулярных нарушений стула (диареи или запоров);
• тошноты, ощущения тяжести после еды;
• отвращения к белковой пище (мясу, птице);
• повышенного газообразования;
• болей в проекции желудка;
• устойчивого снижения веса;
• дисфагии (затруднений при глотании).

Так как патоген передается через слизь или слюну, то инфекция быстро распространяется внутри семьи через пользование общей посудой и предметами личной гигиены. Если у одного члена семьи выявлена хеликобактерия, то остальным близким родственникам тоже рекомендуется пройти соответствующее обследование.

Как подготовиться к сдаче анализа

Прежде чем сдать кал на Хеликобактер Пилори, необходимо ознакомиться с правилами подготовки к анализу и сбора материала. Это могут быть устные указания от врача, либо напечатанные инструкции, которые обычно выдают частные клиники.

• за месяц до исследования следует исключить прием антибиотиков, а за трое суток — слабительных средств;
• в течение трех дней до анализа нельзя употреблять грубую клетчатку и красящие продукты;
• собирать кал нужно в специальную емкость (можно взять в клинике или купить в аптеке);
• следует брать материал из трех точек, где нет крови, слизи, гноя или мочи;
• необходимо доставить кал в лабораторию в течение двух часов после дефекации;
• повторный анализ на эффективность лечения нужно сдавать через месяц после приема антибактериальных препаратов.

Анализ кала на Хеликобактер Пилори: обзор методик и оценка результатов

Существуют разнообразные способы выявления патогена. Они отличаются по исследуемому материалу, методу лабораторного исследования, точности, информативности. Немаловажное значение так же имеет ценовой фактор, ведь не каждый человек может заплатить за анализ требуемую сумму. Некоторые методики применяются только в дорогостоящих клиниках, но это не значит, что пациенты с низким доходом не смогут получить необходимую медицинскую помощь в данном вопросе.

Наименее затратным, и в то же время достаточно информативным является анализ кала на Хеликобактер Пилори. Больному не нужно лично приходить в лабораторию, необходимо лишь своевременно доставить туда материал для исследования. Этот пункт особенно важен для родителей маленьких детей, так как малыши часто беспокоятся при посещении незнакомых учреждений.

Еще одним достоинством этого анализа является простота и безболезненность процедуры сбора материала. После испражнения нужно просто положить кал в чистую емкость и отнести в клинику. В других исследованиях пациенту могут прокалывать вену или вводить в пищеварительный тракт дуодендальный зонд.

Различают три метода анализа кала на Хеликобактер Пилори:

• бактериологический посев;
• иммунологическое исследование;
• полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Способ бактериологического посева

Классический способ выявления патогенных микроорганизмов — посев на питательной среде. Анализ кала на Хеликобактер Пилори этим методом считается наиболее сложным по ряду причин:

• при посеве необходимо исключить доступ кислорода к питательной среде;
• в кале редко присутствуют активные спиралевидные бактерии, а кокковые формы не распознаются;
• реакция на чувствительность к антибиотическому веществу может быть неточной;
• анализ делается не менее недели.

В данном случае бактериологический посев считается наименее точным методом исследования.

Иммунологическое исследование

Этот вид анализа кала на хеликобактер хилари основан на взаимодействии готовых (помеченных специальными метками) антител с антигеном (биоматериалом). При наличии положительной реакции (комплекс антиген-антитело) специалист может диагностировать инфекцию. Метод подходит для обнаружения любой формы бактерии. Результаты исследования сообщаются пациенту уже на следующий день.

Такой анализ назначают на первичном этапе обследования, до проведения инструментальной диагностики. Он не является затратным и прост в выполнении.

Полимеразная цепная реакция

Молекулярно-генетическая диагностика считается самой точной и информативной методикой выявления хеликобактерии. С помощью полимеразной цепной реакции обнаруживается специфическая ДНК патогена, поэтому даже при минимальном содержании в каловых массах бактерий, в том числе кокковых форм, можно легко выявить инфекцию.

Анализ кала на Хеликобактер Пилори методом ПЦР обычно назначают пациентам, которые имеют подтвержденные патологии в желудке или двенадцатиперстной кишке, в частности:

• полипы;
• опухоли;
• рефлюкс;
• атрофию слизистых.

С помощью ПЦР можно узнать роль микроба в развитии этих болезней и правильно составить схему лечения.

Методика отличается высокой точностью — от 94 до 100%. Положительная реакция наблюдается даже при наличии всего десяти микроорганизмов. Специалисты могут выявлять и изучать различные модификации и штаммы патогена. Исследование является простым в исполнении и безопасным для пациента.

К недостаткам можно отнести относительно высокую стоимость анализа и отсутствие возможности установить чувствительность бактерии к антибиотикам.

Расшифровка анализов

При иммунологическом тесте и ПЦР могут быть лишь два результата:

• отрицательный — патоген не обнаружен;
• положительный — хелибактериоз.

В результатах бактериологического анализа, помимо перечисленных двух пунктов, добавляются сведения о чувствительности к антибиотикам, а именно:

• S — высокая;
• I — умеренная;
• R — резистентность.

Диагностический анализ на выявление в организме микроорганизма Хеликобактер Пилори посредством проведения ПЦР распространен во всем мире. Для проведения анализа достаточно сдать кал, никаких инвазивных процедур не требуется (как, например, в случае с ФГДС методом диагностики).

Самыми серьезными минусами этой процедуры считают сравнительно низкую точность и неудобство в сдаче материала для анализа.

ПЦР анализ на наличие в желудочно-кишечном тракте бактерии Хеликобактер Пилори проводится практически во всех, как государственных, так и частных медицинских центрах, в которых имеется своя лаборатория. Назначение на проведение данного вида исследования можно получить у врача-терапевта, гастроэнтеролога и иммунолога.

Прохождение исследования по направлению актуально только для государственных медицинских учреждений. В частных центрах анализ можно проводить без направления, просто по собственному желанию.

Процедура это платная. Цена на ПЦР обследование может отличаться в зависимости от клиники и от города. Например, в Москве данное исследование стоит около 600 рублей, тогда как в регионах обойдется в 250-350 рублей. В частных клиниках, по данным на 2016 год, цена выше на 5-10%: в районе 650 рублей для столицы.

Насколько точен тест?

Современные исследования указывают на достаточно высокую точность ПЦР анализа кала на наличие бактерии Helicobacter Pylori. Чувствительность теста колеблется в диапазоне между 64-94%.

Некоторых пациентов может смутить столь большой разброс в чувствительности теста. Однако стоит понимать, что в медицине нет идеально точных диагностических методик, а показатель в 64-94% является более чем удовлетворительным. Для более точного диагноза следует сочетать этот метод с другими способами выявления Хеликобактер (анализ крови, дыхательный тест, и так далее).

Диагностика и лечение Хеликобактер (видео)

Преимущества и недостатки метода

К преимуществам ПЦР анализа кала относят:

1. Немалую чувствительность (точность) метода.
2. Не требуется инвазии (проникновения, как при ФГДС) для выполнения процедуры, а сама процедура технически очень проста.
3. Абсолютная безопасность для здоровья пациента.
4. Возможность обнаружения различных штаммов и форм бактерии Helicobacter Pylori.
5. Возможность с этой же пробы сразу провести анализы и на другие заболевания.

К недостаткам ПЦР анализа кала относят:

• невозможность определения чувствительности к антибиотикам;
• невозможность отличить прошедшую инвазию Хеликобактер Пилори от существующей;
• сам метод доступен не в каждом медицинском центре.

Общее описание и виды метода

ПЦР тест на наличие в ЖКТ микроорганизма Helicobacter Pylori основан на молекулярно-генетическом анализе многократного умножения образца бактерии Хеликобактер Пилори. Стоит отметить, что для этого метода диагностики берется не кровь, а кал.

ПЦР анализ проводится с помощью двух способов:

• культурального;
• иммунологического.

При культуральном ПЦР анализе биологический материал кладут в чашку Петри, в которой заблаговременно создаются благоприятные условия для размножения Хеликобактер Пилори.

Через 5-7 дней проводится осмотр чаши и если в ней за этот срок развилась колония микроорганизма Helicobacter Pylori, то результат является положительным. К сожалению, на точность этого метода могут повлиять выпитые накануне антибиотики, о чем пациенты должны быть осведомлены.

При иммунологическом виде ПЦР анализа маркированные антитела помещают в анализируемый образец. В итоге, при наличии бактерии Хеликобактер Пилори, можно увидеть образование специфических комплексов антиген-антитело, что говорит о положительном результате анализа.

Подготовка и сдача анализа

За трое суток до проведения теста следует отменить прием антибиотиков, слабительных средств, ректальных свеч и замедляющих перистальтику лекарств. При невозможности отмены препаратов из списка (по жизненным показаниям) требуется консультация с врачом.

Сбор кала для анализа осуществляется исключительно в выданную в больнице или лично приобретенную специальную медицинскую тару (ее можно купить в любой аптеке).

Доставлять исследуемый биоматериал нужно как можно быстрее. При невозможности быстрой транспортировки следует хранить тару с биоматериалом при температуре в +3-9 градусов, но не более суток с момента сбора.

Важно: если анализ проводится повторно, после проведения антибактериальной терапии, тест нужно проводить не ранее четырех недель после окончания лечения. В иных случаях он будет неэффективен и покажет ложный результат.

Расшифровка и нормы

Расшифровка результатов для бактериологического метода ПЦР исследования:

• количество микроорганизмов 0 - микроорганизм Хеликобактер Пилори не выделен (норма);
• количество больше 0 - наличие хелибактериоза (подтверждается даже в том случае, если больной не имеет симптомы болезни), требуется лечение;
• S - чувствительность к указанному в результате антибиотику;
• R - резистентность (полная устойчивость) к указанному в результате антибиотику;
• I - умеренная чувствительность к указанному в результате антибиотику.

Расшифровка результатов для иммунологического метода ПЦР исследования:

• отрицательный результат - микроорганизм Helicobacter Pylori не выделен;
• положительный результат - наличие хеликобактериоза, требуется лечение.

Исследование используется для определения антигенов H. pylori в образцах кала методом иммунохроматографии с целью диагностики инфекции H. pylori.

Тест рекомендован многочисленными международными консенсусами, высокоинформативный метод, является ”золотым стандартом” в диагностике хеликобактериоза, используется для первичной диагностики и для контроля за проведенной антихеликобактерной терапией.

Одним из самых перспективных неинвазивных методов подтверждения хеликобактерной инфекции (являющейся в т.ч. фактором риска различных онкозаболеваний желудочно-кишечного тракта и др.) считается определение антигенов возбудителя в кале. Метод высокочувствительный и специфичный (около 90 %), малоинвазивен, прост в применении. Применение теста особенно удобно в педиатрии.

Преимущества метода:

1. Неинвазивный метод (диагностика без использования фиброгастроскопии).

2. Детекция как активных, так и кокковых форм бактерии.

3. Высокая точность, чувствительность и специфичность (до 95-98%).

4. Длительное хранение образцов без потери информативности, а так же возможность транспортировки.

5. Метод рекомендован 3-я международными (Маастрихтскими) соглашениями по диагностики и лечению хеликобактериоза, российской гастроэнтерологической ассоциацией и российской группой по изучению Helicobacter pylori как наиболее точный и удобный для пациента.

6. Используется у взрослых и детей.

7. Не требуется предварительной подготовки.

Бактерии вида Helicobаcter pylori являются причиной возникновения большинства гастритов, до 80% случаев язвенной болезни желудка и до 90% язвенной болезни двенадцатиперстной кишки. Считается, что во всем мире инфицировано более половины населения, а в России - более 80% жителей.

Хеликобактериоз – это широко распространенное инфекционное заболевание с оральным, фекально-оральным и контактным путем передачи возбудителя, сопровождающееся преимущественным поражением антрального отдела желудка, двенадцатиперстной кишки. Источником инфекции является больной человек или бактерионоситель, а наиболее чувствительны к ней люди с иммунодефицитами. Инкубационный период составляет около семи дней.

Возбудителем инфекции является Helicobacter pylori – спиралевидная грамотрицательная бактерия, способная инфицировать желудок и двенадцатиперстную кишку. Helicobacter pylori вызывает лишь предрасположенность к гастриту и язвенной болезни, и только при дополнительных факторах – группе крови О(I), наследственной предрасположенности, курении, злоупотреблении алкоголем, приеме ульцерогенных лекарственных препаратов, частых стрессах, неполноценном питании – возникает язвенный дефект.

В настоящее время доказано, что хеликобактерная инфекция повышает риск рака желудка. Более половины населения в мире являются носителями Helicobacter pylori, однако у большинства носителей нет никаких симптомов, и лишь примерно у 15 % из них возникает гастрит или язвенная болезнь.

Правила подготовки к исследованию:

• Не требуется предварительной подготовки.

Хеликобактер пилори

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет увеличить число копий ДНК бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК. Синтезированное количество ДНК идентифицируют методами иммуноферментного анализа или электрофореза. ПЦР-диагностика позволяет обнаружить возбудителя на самых ранних этапах инфекционного процесса, в любой биологической среде организма, с возможностью количественного определения вирусов или бактерий.

Хеликобактер пилори – спиральные грам-отрицательные бактерии, которые были обнаружены на слизистой оболочке желудка более полувека назад, но они не вызывали особого интереса до начала 1980-х гг., когда был разработан метод культивирования организмов из биопсийного материала слизистой оболочки.

В 1983 г. австралийский врач Барри Маршалл обнаружил, что H. pylori почти всегда присутствует в желудке пациентов, страдающих хроническим гастритом или язвой. Бактерии, сами по себе, язвы желудка или двенадцатиперстной кишки не вызывают, однако, провоцируют воспалительные процессы в желудке и ослабляют естественную защиту слизистой от воздействия кислотной среды желудка; при этом H. pylori стимулирует гиперсекрецию соляной кислоты, воздействуя на механизмы ее регуляции. Если проводимая терапия приводит к снижению кислотности желудка, то язва может затянуться, но после прекращения лечения существует вероятность ее повторного возникновения. Длительные наблюдения показали, что у больных, не получавших лечение против H. pylori, язва рецидивирует через 2 года в 100 %, а у пролеченных пациентов возникает повторно (обычно вследствие реинфекции H. pylori) только в 5-10 %. Источником заражения H. pylori является инфицированный человек, кошки, свиньи, крупный рогатый скот и обезьяны (макака-резус). Чаще заражение происходит через загрязнённую фекалиями воду и пищу (овощи, при поливе которых использовалась загрязненная вода). Объектом передачи инфекционного начала могут быть загрязнённые руки, слюна, капли слюны или мокроты при кашле. Исследования, проведенные медиками из США, показали, что H.pylori можно считать семейной инфекцией, и, если в семье выявлен носитель H.pylori, то вероятность остальных членов семьи оказаться инфицированными составляет 95%. Обнаружение хеликобактера методом ПЦР позволяет значительно быстрее установить диагноз, проводить контроль лечения. Материалом для исследования могут служить желудочные аспираты, кал, слюна.

Обращаем Ваше внимание, что взятие урогенитального мазка, мазка из зева, носа, полости рта - платное.