Зачем берут кровь из пуповины. Стволовые клетки – все, что вы хотели узнать о пуповинной крови

Радикальным методом лечения многих тяжелых гематологических болезней является , которые выделяют из ткани костного мозга или крови. Осуществить его возможно путем поиска подходящего донора, что довольно не просто. Вероятность существования неродственного донора, совместимого по HLA-антигенному составу, составляет 1:100000. Для этого необходимы целые регистры типированных доноров, исчисляемые несколькими сотнями тысяч человек. Частично решить эту проблему помогает заготовка пуповинной крови.

Клиническое использование

Кровь, полученная из плаценты, является богатым источником гемопоэтических клеток. Концентрация колониеобразующих единиц в ней значительно превышает их количество в крови взрослого человека даже после стимуляции факторами роста. Она приближается по своему составу к костномозговой ткани. Поэтому стволовые клетки, содержащиеся в пуповинной крови, могут успешно применяться в гематологии для лечения следующих заболеваний:

• миелодиспластические синдромы;
• некоторые врожденные заболевания ( , наследственные гемоглобинопатии, синдром Барра и др.).

Трансплантация гемопоэтических клеток, полученных из плацентарной крови, является перспективным направлением в медицине, которое уже применяется в неврологии (последствия травм, дегенеративные заболевания нервной системы), ревматологии (диффузные ), онкологии и других отраслях.

Эффективность такого лечения определяется:

• своевременностью диагностики и лечения заболевания;
• степенью гистосовместимости (по системе HLA) донора и реципиента;
• возрастом больного (дает хорошие результаты у детей младше 5 лет);
• количеством пересаженных стволовых клеток (если их мало, то повышается риск рецидива патологического процесса или несостоятельности трансплантата).

Заготовка

Пуповинную кровь получают во время родов через естественные родовые пути или путем кесарева сечения. На этапе планирования процедуры беременную женщину всесторонне обследуют и исключают у нее заболевания инфекционной природы ( , и др.).

Готовясь к родам, в асептических условиях подготавливают систему для забора крови. Она состоит из специального контейнера с гемоконсервантом и устройством для взятия крови.

При нормальных родах через естественные родовые пути забор крови может осуществляться в двух вариантах:

• Если плацента находится в полости матки и еще не отделилась, то эксфузия крови выполняется после наложения зажима на пупочный канатик и отделения новорожденного от плодного места. Для этого пуповину тщательно обрабатывают растворами антисептиков, после чего производят пункцию пупочной вены, располагая емкость для сбора материала на 50-70 см ниже живота роженицы, чтобы кровь стекала в нее самопроизвольно.
• Если плацента уже выделена из полости матки, то ее располагают на специальной рамке плодной частью книзу, затем также обрабатывают и пунктируют вену пупочного канатика, после чего получают кровь в контейнер.

Из артерии пупочного канатика дополнительно берется 10 мл крови для первичного этапа обследования на принадлежность к группе крови и скрытые инфекции.

После окончания процедуры контейнер отсоединяют и транспортируют в банк пуповинной крови в специальном холодильнике или дополнительном контейнере, защищенном от перепада температур. При этом длительность хранения крови с гемоконсервантом до ее фракционирования не должна превышать 24 часов. Иначе стволовые клетки гибнут.

Хранение стволовых клеток

Выделение гемопоэтических клеток из пуповинной крови проводится в асептических условиях.

• Для этого кровь подвергается центрифугированию на высоких оборотах, в результате чего от нее отделяется плазма.
• После этого приступают к осаждению эритроцитов путем добавления седиментирующего вещества (желатин, гидроксиэтилкрахмал).
• Полученную клеточную взвесь смешивают с физиологическим раствором и дважды центрифугируют.
• Затем с помощью шприца отделяют клеточный осадок и подготавливают его к заморозке и длительному хранению.

Полученные из пуповинной крови стволовые клетки хранятся при низких температурах в замороженном состоянии:

• в холодильных камерах с температурой -80 градусов (до 6 месяцев);
• в парах жидкого азота при температуре -150 градусов (несколько лет);
• в емкостях с жидким азотом и температурой -196 градусов (более 20 лет).

Для замораживания клеточной взвеси ее предварительно охлаждают до +4 градусов на ледяной бане или в условиях холодильника. Затем шприцом набирают эту взвесь и переносят ее в мешок для консервирования, добавляя по каплям ограждающий раствор, после чего мешок запаивается и помещается в специальный аппарат для программного замораживания. При этом сам процесс осуществляется по четырехступенчатой программе, что позволяет сохранить жизнеспособность клеток в течение длительного времени.

Для использования замороженных образцов стволовых клеток непосредственно перед трансфузией производится медленное размораживание клеточной взвеси на водяной бане с температурой +40 градусов. После тщательного перемешивания выполняется исследование на сохранность клеток и их жизнеспособность.

Лабораторное тестирование

Применение в клинической практике крови, полученной из пуповины, требует специального тестирования в условиях лаборатории. Это позволяет определить принадлежность по HLA-системе, оценить качество препарата и выявить потенциальную возможность заражения инфекционными заболеваниями.

Перечень необходимых лабораторных анализов включает:

• определение объема пуповинной крови и содержания в нем клеточных элементов (стволовых клеток, лейкоцитов, эритроцитов);
• анализ крови на маркеры вирусных гепатитов;
• биохимическое исследование крови ();
• выявление антител к ВИЧ, бледной трепонеме, ;
• посев крови на стерильность;
• определение HLA-генотипа, группы крови по системе АВ0 и резус-фактору.

Для проведения всех исследований в полном объеме необходимо около 10 мл крови. Из них 4 мл сразу берут для тестирования, а остальные 6 мл центрифугируют и замораживают, после чего снова исследуют. Это дает возможность оценить качество трансплантата и прогнозировать время приживления кроветворных клеток в организме больного.

Пуповинную кровь для исследований используют очень экономно с целью минимизации потерь гемопоэтических клеток.

• Определение групповой принадлежности, HLA-фенотипа, биохимических показателей производится в порции крови, взятой из артерии пуповины.
• Бактериологическое исследование осуществляется в оставшейся после центрифугирования эритроцитарной массе.
• Серологические исследования сыворотки крови с целью выявления инфекций проводят с использованием плазмы, полученной в процессе фракционирования.
• Оценка концентрации клеток-предшественников гемопоэза производится в клеточном осадке, полученном путем разделения крови на фракции.

Преимущества и недостатки использования пуповинной крови

В настоящее время многие родители задумываются о том, стоит ли заготавливать пуповинную кровь ребенка, важно это или нет? Для того чтобы ответить на эти вопросы, рассмотрим преимущества этого метода лечения.

1. Процедура является абсолютно безопасной (не наносит вред здоровью матери и ребенка).
2. Не требует дополнительного обезболивания.
3. Имеет низкий риск заражения инфекционными заболеваниями.
4. Предоставляет возможность длительного хранения гемопоэтических клеток.
5. Обеспечивает биологическое страхование жизни ребенка при развитии у него тяжелых заболеваний (особенно кроветворной системы).

Однако существуют и недостатки применения пуповинной крови как источника стволовых клеток.

1. Основным из них является относительно небольшой объем получаемого материала и потери его при заготовке и лабораторном тестировании.
2. Еще одним недостатком этой процедуры является ее высокая стоимость при небольшой вероятности применения у ребенка. Однако она малосопоставима со стоимостью пересадки костного мозга, которая исчисляется десятками тысяч долларов.

В настоящее время в России и других странах существуют специальные банки пуповинной крови. Это могут быть частные и государственные структуры. Последние преследуют цели создать определенный запас биологического материала, который может использоваться для научных исследований и лечения больных.

Частные банки занимаются хранением именных образцов, которыми можно воспользоваться в случае болезни. Они предлагают своим клиентам различные тарифы:

• Средняя стоимость забора и хранения пуповинной крови в Гемабанке составляет 65000 рублей, отдельно оплачивается каждый год хранения (7000 рублей).
• В банке стволовых клеток «Криоцентр» пакет хранения стволовых клеток (25 лет) имеет общую стоимость около 230 000 рублей.

В последнее время будущим мамам накануне родов все чаще предлагают новую услугу – сбор пуповинной крови и отправка ее в криобанк. Процедура эта не из дешевых и обходится в несколько десятков тысяч рублей. Что это такое и кому она необходима?

Плацента и пуповина – это те побочные продукты родов, которые обычно выбрасываются. И только в последнее время ученые выяснили, что в них содержатся самые что ни на есть полезные компоненты – стволовые клетки ребенка. Если собрать их, сохранить, а потом правильно использовать, то они могут оказать неоценимую помощь в лечении многих заболеваний.

Что такое стволовые клетки

Стволовые клетки – это универсальные клетки организма, из которых начинается рост всех других клеток. Особенно активно этот процесс идет у маленьких детей, замедляясь с возрастом. Для каждого органа или вида тканей есть свои стволовые клетки – крови, кожи, сердечной мышцы и так далее.

Основной вид стволовых клеток, которые применяются сегодня – стволовые клетки крови. Пуповинная кровь является их вторым по важности источником после костного мозга, но имеет перед ним одно неоспоримое преимущество: не надо искать подходящего донора, поскольку донор и реципиент – одно лицо. К тому же стволовые клетки младенца подойдут не только ему самому, но и с большой вероятностью ближайшим родственникам: брату, сестре или родителям.

Уже сегодня стволовые клетки пуповиной крови можно применять для лечения более 80-ти болезней крови – это лейкозы, лейкемия, тяжелые формы анемии (малокровия), нарушения свертываемости крови, а также некоторых пороков развития. Однако ученые всего мира активно проводят исследования, пытаясь расширить область их применения и научить их превращаться в клетки других органов, например сердца, печени, сосудов. Это позволит врачам буквально творить чудеса – восстанавливать погибшие ткани, например, сердце после инфаркта, или печень, поврежденную циррозом. И такие операции уже проводятся в научных лабораториях.

Когда необходим сбор пуповинной крови

Конечно, вероятность тяжелой болезни у здорового ребенка, а значит и того, что сохраненные клетки пригодятся самому младенцу, очень и очень мала. Но есть некоторые ситуации, в которых сбор пуповинной крови становится более актуальным:

— Если во время скрининга или УЗИ при беременности были обнаружены проблемы, например пороки развития;
— Если у ближайших родственников ребенка были болезни крови – лейкозы, лейкемия, лимфомы, лимфогранулематоз;
— В тех семьях, где уже есть ребенок с болезнями крови, стволовые клетки его брата или сестры подойдут для лечения лучше всего;
— Если отец и мать ребенка разных национальностей, поскольку в этом случае риск болезней крови выше;
— Если беременность возникла в результате ЭКО;
— Если есть любые опасения и вероятность, что стволовые клетки могут пригодиться в ближайшем будущем.

Как проходит процедура

Процедура сбора пуповинной крови абсолютно безопасна для всех ее участников – и для мамы, и для малыша. Кровь из пуповины берется уже после ее перерезания. Выполняет эту процедуру акушерка, которую надо заранее предупредить и приготовить комплект для сбора пуповинной крови, который выдается криобанком. Сбор возможен как после естественных родов, так и после кесарева сечения.

После сбора крови в специальный контейнер с защитой от свертывания она транспортируется в банк, с которым у родителей заключено соглашение. Там кровь специальным образом обрабатывается, из нее выделяются стволовые клетки, а жидкая часть отправляется на анализы – ВИЧ, гепатиты, сифилис, цитомегаловирус.

Далее стволовые клетки помещаются в специальный герметичный контейнер для заморозки: это может быть криомешок или пробирки. Многие банки предоставляют возможность выбора контейнера. Мешок для хранения является золотым стандартом, и в случае необходимости его принимают любые заграничные клиники. Но есть и обратная сторона: клетки из мешка можно использовать только один раз, в отличие от пробирок, которые можно размораживать по одной и использовать несколько раз. Однако пробирки сейчас принимают не во всех клиниках России и совсем не принимают в Европе, и воспользоваться ими можно будет только в далеком будущем.

Каждый образец стволовых клеток снабжают несколькими так называемыми пробирками-спутниками из той же крови. Это делается для того, чтобы при необходимости можно было провести дополнительные анализы, не размораживая основной образец.

Наконец, в контейнер со стволовыми клетками добавляется криопротектор – вещество, препятствующее гибели клеток при замораживании, и он отправляется на заморозку вместе с пробирками-спутниками. Сначала в специальной установке происходит очень медленное замораживание до -80°С, а затем образцы переносят на хранение в жидкий азот при температуре -196°С. Такая низкая температура обеспечивает длительное хранение без потери жизнеспособности клеток в течение десятков лет.

Может ли произойти разморозка в случае отключения в банке электричества? Обычно для таких случаев во всех банках имеется двойная защита и собственный генератор. Кроме того, хранится кровь в особых сосудах (дьюарах) с жидким азотом, работа которых во многом зависит от регулярного подвоза новых партий жидкого азота. Поэтому организация процесса здесь играет более важную роль, чем внешние случайности.

Когда банк отказывает

Есть совсем немного ситуаций, когда банки стволовых клеток отказываются принимать материал. Обычно это связано с заражением образца инфекцией: либо кровь была инфицирована во время сбора в роддоме бактериями и грибками, либо результаты анализов крови выявили наличие в ней ВИЧ, гепатита или сифилиса.

Нецелесообразно хранение стволовых клеток пуповинной крови и в случае выявления в ней признаков опухолевых заболеваний и клеток лейкоза. Это становится ясно на этапе выделения, отбора стволовых клеток и их определения под микроскопом.

Банки стволовых клеток в России

Банк стволовых клеток осуществляет все процедуры по подготовке и хранению стволовых клеток. Именно с ним надо заключать договор на хранение, он выдает систему для сбора крови в роддоме, а после помещения образца в хранилище – именной идентификационный сертификат. Всего в мире функционирует около 200 банков пуповинной крови, в России около 11.

Россия

— Гемабанк – создан на базе онкологического центра им. Н.Н. Блохина (г. Москва) и является подразделением российской биотехнологической компании « ».
— Криоцентр – на базе Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН .
— Банк стволовых клеток Перинатального медицинского центра г. Москва, www.perinatalmedcenter.ru , www.bank-pmc.ru.
— Банк «Клинического центра клеточных технологий», г. Самара – государственное учреждение здравоохранения Самарской области.
— Покровский банк стволовых клеток человека – частный, г. Санкт Петербург.
— Банк компании «Транс-технологии », г. Санкт-Петербург.

Трансплантация стволовых клеток

Трансплантация на сегодняшний день в большинстве случаев проводится внутривенно. Но с каждым днем технологии совершенствуются, и в скором времени будет возможно пересаживать стволовые клетки непосредственно в больной орган.

Если вдруг у ребенка выявится проблема, при которой пригодятся его стволовые клетки, банк выдает образцы и доставляет их в то лечебное учреждение, в котором будет проводиться трансплантация.

Где проводят трансплантацию стволовых клеток крови:

Москва
— ФГБУ Российская детская клиническая больница, www.rdkb.ru
— Российский онкологический научный центр им. Блохина, www.ronc.ru
— ФГБУ Гематологический научный центр РАМН
— ФБУ Главный военный клинический госпиталь им.Бурденко, www.gvkg.ru
— Центральная детская клиническая больница ФМБА России, www.dkb38.ru
— ФГБУ Федеральный медицинский биофизический центр им. Бурназяна, www.fmbcfmba.ru

Санкт-Петербург
— Военная медицинская академия
— НИИ Гематологии и трансфузиологии
— Государственный медицинский университет им. Павлова (Институт детской гематологии им. Горбачевой)

Россия
— Екатеринбург, Городская больница №7
— Екатеринбург, Областная больница №1
— Новосибирск, Институт клинической иммунологии
— Самара, областная больница
— Ярославль, Областная клиническая больница

Пожалуй, ни один научный термин не стал так быстро достоянием общественности, снискав как хорошую, так и дурную славу. Рекламные слоганы уверяют, что за стволовыми клетками будущее, и каждой беременной женщине советуют подумать о сохранении пуповинной крови своего ребенка во время родов. Но имеет ли смысл это делать?

Из одной клетки
Ежедневно мы встречаем множество разных людей, но даже не задумываемся, что каждый из нас произошел из одной единственной оплодотворенной яйцеклетки! Она содержит не только информацию об организме, но и схему его последовательного будущего развития. В течение первых пяти дней после зачатия в результате деления этой самой клетки образуется шарик из совершенно одинаковых неспециализированных клеток. Примерно через шесть -семь дней он образует бластоцисту, которая делясь формирует за считанные недели все органы и ткани человека.

Под микроскопом
В бластоцисте появляются три лепестка: экто-, эндо- и мезодермальный. Все клетки на этом этапе «стволовые», так как способны делиться и превращаться в различные ткани из своего лепестка. Экто- в кожу и нервы, эндо- в полые органы, мезо- в мышцы и кости. Именно поэтому стволовые клетки ученые любя называют «всемогущими».
«С их помощью можно сформировать заново и кроветворную ткань, и сердечно-мышечную, и множество других видов тканей. Это поистине революция в медицине, изменившая подходы к лечению тяжелых заболеваний», - говорит Александр Приходько.

факт Ученые всего мира каждый год пополняют список заболеваний, поддающихся лечению

Тайна самоизлечения
«Всемогущие» клетки есть у каждого из нас. В организме взрослого человека их вырабатывает костный мозг. Это основной источник стволовых клеток, но далеко не единственный. Эти клетки есть в жировой ткани, коже, мышцах, печени, легких, сетчатке глаза, то есть практически во всех органах и тканях организма. Стволовые клетки призваны восстанавливать и регенерировать организм человека с момента его рождения до самой смерти. «Когда в организме возникает «поломка», они оказываются в зоне поражения и «латают» прореху», - поясняет Александр Приходько. Сама природа заложила в человеческий организм уникальный восстанавливающий механизм! Так почему же, перешагнув тридцатилетний рубеж, у нас на лице появляются заметные морщинки и седина, покалывает сердце, и мы все чаще обращаемся к доктору? Причина в том, что в процессе взросления человека наблюдается катастрофическое снижение выработки количества стволовых клеток: при рождении 1 стволовая клетка встречается на 10 тысяч «обычных», к 20–25 годам - 1 на 100 тысяч, к 30 - 1 на 300 тысяч. К 50-ти годам в организме остается всего 1 стволовая клетка на 500 тысяч, причем именно в этом возрасте, как правило, уже появляются болезни, которые тяжело поддаются самоизлечению, и требуется серьезная помощь извне. стволовыми клетками.

При заболевании стволовые клетки устремляются к пораженному органу и восстанавливают его, преобразуясь в необходимые организму клетки - костные, печеночные, сердечной мышцы, и даже мозга.

Они такие разные…
На сегодняшний день стволовые клетки подразделяют на эмбриональные и клетки взрослого человека.

• Эмбриональные стволовые клетки получают из остатков абортивного материала на 9–12 неделе беременности. Помимо этических и юридических трений, использование непроверенного абортивного материала чревато осложнениями, такими как заражение пациента вирусом герпеса, гепатита, и даже СПИДом.
• Самый доступный источник стволовых клеток - костный мозг. В нем их концентрация максимальная. В костном мозге выделяют сразу два вида стволовых клеток - гемопоэтиче-ские (кроветворные), из которых формируются абсолютно все клетки крови, и мезенхимальные, способные восстановить практически все органы и ткани. Стволовые клетки костного мозга берут под местным наркозом из подвздошной кости взрослого человека. Затем их отправляют в специальную лабораторию, и лишь потом применяют для лечения.

Назад в прошлое

1908 год - русский гематолог Александр Максимов впервые ввел понятие «стволовая клетка».
1932 год - швейцарский хирург Пол Нихансон ввел человеку клетки эмбрионов овец, чтобы стимулировать жизненную активность клеток его организма.
1976 год - профессор Иосиф Чертков с коллегой Александром Фриденштейном открыл фундаментальные свойства стволовых клеток костного мозга.
1992 год - профессор Университета Аризоны Дэвид Харрис «на всякий случай» заморозил стволовые клетки пуповинной крови своего новорожденного сына.
1998 год - американским исследователям Дж. Томсону и Дж. Герхарту удалось выделить стволовые клетки четырехдневного эмбриона человека.
1998 год - в США проведена первая в мире удачная трансплантация «именных» стволовых клеток пуповинной крови девочке с опухолью спинного мозга.
2000 год - получение эмбриональных стволовых клеток было признано третьим по важности событием в эволюции биологии ХХ века после открытия двойной спирали ДНК и расшифровки генома человека.
2001 год - на прилавках появились первые кремы с биологически активными добавками на основе «синтетических стволовых клеток».
2003 год - на базе Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН создает первый в России банк стволовых клеток.

«Жидкое» золото медицины
Уникальный «источник» стволовых клеток - плацентарно-пуповинная кровь, собранная из сосудов пуповины и плаценты после рождения ребенка. Пуповинная кровь - это некий объем крови, биологически принадлежащей новорожденному. Именно благодаря ей во внутриутробном периоде осуществляется обмен веществами между организмом плода и его матери. До конца 90-х годов послед и оставшуюся в его сосудах пуповинную кровь отправляли на «утилизацию». Сегодня отношение к этому кардинально изменилось. И неспроста. Александр Приходько выделяет несколько неоспоримых преимуществ пуповинной крови: «В ней содержится наибольшее количество стволовых клеток. Они имеют больший потенциал, чем клетки взрослого человека, выделенные, например, из костного мозга. Кроме того, сама процедура забора пуповинной крови не причиняет вреда ни маме, ни малышу, она абсолютно безболезненна и безопасна. И, наконец, весь процесс забора, проверки и обработки обходится гораздо дешевле, чем получение стволовых клеток другим способом». Какие клетки быстрее примет иммунная система? Безусловно, свои собственные. Риск отторжения минимален.

Совет Перед тем как сделать окончательный выбор в пользу того или иного банка стволовых клеток, обязательно съездите туда и самостоятельно все посмотрите.

Срок годности
По существующим на сегодняшний день данным, после 15 лет хранения стволовые клетки пуповинной крови полностью сохраняют свои качества. Клетки, взятые из костного мозга, начали замораживать раньше, и, как показывают исследования, они благополучно хранятся и 30 лет! Но это лишь первые результаты - раньше таких исследований просто не проводилось. Ученые уверены, что при правильной заморозке и хранении клетки имеют неограниченный срок годности.

Серьезный банк пуповинной крови - это не просто «бочка с азотом». Его строительство, которое будет отвечать всем современным российским и международным
требованиям, - дело сложное. И отнюдь не дешевое. Позволить себе это могут только очень
крупные организации.

Где хранить?

• Существует два типа банков: донорские банки-регистры пуповинной крови (их в мире 75 %) и банки персонального хранения (их 25 %). Первые хранят донорский материал и передают его на платной основе для больных, которым он может подойти, и для научных исследований. Во втором случае речь идет о так называемом персональном хранении. То есть доступ к материалу, взятому из пуповинной крови, имеет только семья ребенка.
• Банк обязан располагать соответствующими лабораторными мощностями и условиями хранения клеточного материала. Технология получения клеток должна быть зарегистрирована и одобрена к медицинскому применению. «Родители часто спрашивают, в какую компанию обратиться? Я рекомендую Банк Стволовых Клеток «КриоЦентр» или Гемабанк», - говорит Дмитрий Шаменков.
• Основной признак надежности банка - наличие лицензии Рос-здравнадзора (ранее Минздрава), без которой официальная деятельность данного учреждения вообще невозможна.

Сбор пуповинной крови
Практически все акушерки в Москве и Подмосковье уже имеют опыт сбора пуповинной крови. Банк, с которым будущая мама заключает договор, выдает ей на руки специальный контейнер или же доставляет его в роддом. В случае необходимости организация отправляет специалиста для сбора и консультации. Вам или близким родственникам нужно лишь позвонить в выбранное учреждение и сообщить, что вы поехали в роддом (или взять с собой контейнер и договориться с акушерками). Забор крови проводится после рождения ребенка и пресечения пуповины. Ни для малыша, ни для мамы эта процедура не представляет никакой угрозы. Кровь собирают в контейнер с антикоагулянтом (веществом, препятствующим свертыванию) и отправляют в специализированную лабораторию для обработки. Процедура у акушеров отработана настолько, что ее проводят как в ходе обычных родов, так и при кесаревом сечении, а также в случае многоплодной беременности отдельно для каждого из родившихся детей.

В определенных случаях стволовые клетки пуповиной крови используют для лечения близких родственников. Существует большая вероятность того, что стволовые клетки родителей или детей подойдут другим их детям, братьям и сестрам.

Цена вопроса
В Москве цены на сохранение стволовых клеток колеблются от 45000 до 96000 рублей, в зависимости от выбранного тарифа. Первоначальный платеж включает оплату комплекта для сбора пуповинной крови, процедуры выделения стволовых клеток и тестирования образца, криоконсервации клеток, хранения до конца текущего года. Оплату за хранение стволовых клеток принимают после подписания акта об оказании услуг и выдачи сертификата. Она составляет 3000 рублей в месяц. Скидки и рассрочка платежей возможны. Если вы решили сохранить стволовые клетки, не стесняйтесь задавать вопросы менеджерам.

Потенциальные клиенты
Врачи настоятельно рекомендуют внимательно отнестись к возможности сохранения стволовых клеток пуповинной крови, если…

• В истории вашей семьи встречались злокачественные заболевания или болезни крови.
• В семье уже есть больные дети, которых можно будет вылечить стволовыми клетками, полученными из пуповинной крови новорожденного брата или сестры.
• Члены вашей семьи относятся к разным расам.
• Муж и жена относятся к этническим меньшинствам.
• Вы многодетные родители.
• Беременность возникла в результате искусственного оплодотворения, особенно от анонимного донора спермы.

СОВЕТ Перед тем как заключить с «персональным» банком контракт, предоставьте анализы, гарантирующие отсутствие у вас вирусных инфекций, которые могут стать противопоказанием к хранению стволовых клеток.

Заморозь меня!
После обработки пуповинная кровь помещается в специальный криомешок или три криопробирки - «спутники». Их наличие дает возможность при необходимости дополнительно протестировать образец без размораживания всех собранных клеток.
Каждому образцу с клетками присваивается уникальный идентификационный номер. Стволовые клетки хранятся в жидком азоте при температуре –196 0С. В хранилище всегда имеются запасные банки с жидким азотом. Если возникнет необходимость транспортировки образца для использования в клинике, находящейся в другом городе или государстве, то ее осуществляют специализированные курьерские компании - они тоже отмечены в Договоре, который подписывает клиент или сам Банк.

На пороге в будущее
Несмотря на скандальную шумиху вокруг стволовых клеток, наука движется вперед. Достижения различных направлений молекулярно-клеточной биологии последних лет подбирают ключ к разгадке многих механизмов, необходимых для успешной клеточной трансплантации. Результаты экспериментальных исследований, проведенных на животных, показали большие потенциальные возможности, открывающиеся при использовании этой технологии. Возможно, сохраняя стволовые клетки пуповинной крови вашего малыша, вы делаете шаг в будущее. В здоровое будущее вашего крохи.

Вторая молодость
Стволовые клетки применяют и для модной сегодня процедуры «ревитализации» - омоложения организма клеточными инъекциями в комплексе с другими косметическими процедурами. Средняя продолжительность такого омолаживающего курса, в зависимости от выбранной программы, займет 2,5–3 месяца. Удовольствие это отнюдь не дешевое.
Научное сообщество относится к «омолаживающим» технологиям крайне скептически. «Клеточным омоложением в России занимаются все, кому не лень. Но имейте в виду, что у частных клиник нет и быть не может лицензий на эту деятельность!» - предупреждает Тамара Дугина.

Если кровь хранится в разных криопробирках, ее можно использовать несколько раз. Криомешок можно заморозить и разморозить только один раз .

Юридичекие тонкости
1. В настоящее время в нашей стране практически отсутствует правовое поле, в рамках которого можно свободно применять стволовые клетки. Более или менее, законом регламентировано применение клеток костного мозга, пуповинной крови для лечения лейкозов и некоторых других редких болезней. Остальные методики должны проводиться или в научно-исследовательских государственных профильных институтах, или в организациях, имеющих соответствующую лицензию.
2. Любой новый метод лечения, в том числе и применение стволовых клеток, должен быть надлежащим образом утвержден в надзорных органах. Методическая база по применению стволовых клеток определена на ведомственном уровне (по Академии наук и Минздраву).
3. Приказом Минздрава определен круг научных учреждений, которые имеют право в своих сертифицированных лабораториях получать и применять клеточные культуры. Поэтому те клиники, которые не соблюдают эти условия, работают на свой страх и риск. Не меньше рискуют и их пациенты: они могут оказаться жертвами мошенничества и подорвать свое здоровье. «Оптимистичные утверждения, что при использовании стволовых клеток никакого риска нет, не оправданы. Неграмотное применение клеточных технологий наоборот может навредить здоровью человека», - предупреждает Дмитрий Шаменков.

«Использование стволовых клеток можно считать естесственной формой «биологического» медицинского страхования жизни»

- Владимир Иванович, давайте сразу начнем с центрально­го вопроса: что такое стволовые клетки, чем они отличаются от других клеток организма?

Это уникальная группа клеток организма, способных размно­жаться и давать начало основным клеточным компонентам крови, кост­ного мозга и иммунной системы. Они способны к самовоспроизводству и выполнению необходимых функций, т.е. они могут формировать клетки практически всех известных тканей человека.

- Что является источником стволовых клеток для воз­можной трансплантации?

Во-первых, костный мозг (донорский или аутологичный 2), во-вторых, кровь пациента после проведения процедуры стимуляции кост­ного мозга, в-третьих, кровь, получаемая во время родов из пуповины и плаценты.

- Почему наиболее перспективным, по сравнению с другими источниками, считается использование клеток пуповинной крови?

Получение стволовых клеток из костного мозга и периферичес­кой крови связано с применением инвазивных (хирургических) методов или введением высокоактивных фармакологических препаратов и может проводиться только в условиях специализированных стационаров. Это направление сегодня также развивается.

- В чем же преимущество клеток пуповинной крови?

Это клетки уже сформированного организма - ребенка, кото­рый родился. В мире уже накоплен огромный опыт по их транспланта­ции: имеется более 3 тысяч случаев, из них примерно 90% удачных, в том числе удалось вылечить пациентов со злокачественными заболева­ниями. Стволовые клетки пуповинной крови обладают целым рядом пре­имуществ по сравнению с клетками из других источников: во-первых, они «молоды», т.е. обладают наибольшим потенциалом к делению и дифференцировке. Во-вторых, вероятность инфицирования пуповинной крови в процессе внутриутробного развития ребенка минимальна. По статистике, вирусы герпеса или цитомегаловирус обнаруживаются в крови пуповины менее чем в 1 % случаев (в крови взрослых людей - бо­лее 25%). В-третьих, стволовые клетки пуповинной крови обладают меньшей иммуногенностью 1 при аллогенных 2 трансплантациях. Успеш­ная трансплантация клеток пуповинной крови может быть выполнена даже при частичной несовместимости донора и реципиента, что недостижимо в случае использования костного мозга. В-четвертых, если срав­нивать трансплантацию клеток костного мозга и клеток пуповинной кро­ви, используемая доза стволовых клеток «молодой» пуповинной крови в несколько раз ниже аналогичной по эффекту дозы клеток из костного мозга взрослого человека.

Главное достоинство этих клеток (при «именном» хранении) - абсо­лютная генетическая идентичность тканям ребенка, из пуповинной крови которого они были получены, и частичная - в отношении организма матери и близких родственников. В этом случае современные клеточные технологии и прежде всего - использование стволовых клеток пуповин­ной крови можно считать естественной формой «биологического» меди­цинского страхования жизни и здоровья человека и членов его семьи.

Кроме того, замороженные стволовые клетки могут оказаться неза­менимой основой для новейших, пока неизвестных способов лечения многих заболеваний. Однажды полученные клетки могут храниться деся­тилетиями, и в случае необходимости их останется только извлечь из криогенного хранилища и разморозить, без потери времени на поиск (не всегда успешный) совместимого донора. Так что временной фактор здесь является еще одним преимуществом.

- Владимир Иванович, во всем мире клеточные технологии уже достаточно давно являются сферой научных и практичес­ких интересов. А какова степень исследованности проблемы стволовых клеток в российской науке?Какие научные центры занимаются этой проблемой?

В нашей стране изучением стволовых клеток занимаются многие НИИ, в том числе в Гематологическом научном центре академика А.И.Воробьева. Там очень сильная команда в отделении трансплантации костного мозга, которая занимается и прикладным аспектом стволовых клеток, фактически спасая людей.

Наш Центр акушерства, гинекологии и перинатологии является ро­доначальником клеточной терапии в российской медицине: еще в 80-90-е годы XXвека по заданию Минздрава мы разрабатывали эту проблему и получили хороший эффект, исследуя эмбриональные клетки, то есть клетки, забираемые у эмбриона после аборта. Сейчас идут активные ре­зультативные исследования стволовых клеток пуповинной крови.

- В вашем Центре создан один из первых российских банков стволовых клеток пуповинной крови. Что способствовало его созданию?

Дело в том, что этой деятельностью в мире занимаются уже более 15 лет. По данным зарубежных медиков, трансплантацию стволовых клеток пуповинной крови там используют достаточно широко для лече­ния около 100 заболеваний. У нас в России еще нет такого большого опыта, мы начинаем его создавать и накапливать. При создании нашего банка был учтен опыт аналогичных учреждений, существующих в США, Англии и Германии.

- Созданный вами «КриоЦентр» - это целиком коммер­ческая структура?

Да, сейчас на нашей базе создан первый в России коммерческий банк стволовых клеток, мы его организовали на средства спонсоров. В скором вре­мени планируется создание еще двух банков - в Москве и Петербурге. Но в дальнейшем мы предполагаем создание аналогичного государственного банка, как на Западе, где государство дает деньги на забор и хранение стволовых клеток, а если у кого-то возникла необходимость использовать их для лечения, в частности при злокачест­венных новообразованиях, то больница заказывает эту пуповинную кровь в банке: ее подбирают так же, как подбирают донорские сердце или печень. За это больница платит банку и получает нужный образец.

- Чем регламентирована деятельность «КриоЦентра»?

Все процедуры и процессы по забору и хранению пуповинной крови регламентированы Минздравом, а также соответствуют международным стандартам таких организаций, как Международная Ассоциация стволовых клеток и Международная Ас­социация клеточной терапии. Это организации, ко­торые существуют уже порядка 10 лет и выдают практически все регламентирующие документы, ка­сающиеся работы со стволовыми клетками.

- От каких болезней страхуют челове­ка и во многом - его семью стволовые клетки?

Эти клетки могут быть использованы при лечении большого количества как наследствен­ных, так и приобретенных заболеваний. Напри­мер, при серьезных заболеваниях крови они необ­ходимы для замены кроветворной ткани пациента. Они могут быть применены для лечения острых и хронических заболеваний сердечно-сосудистой, эндокринной, центральной нервной системы (ин­фаркт миокарда, инсульт, сахарный диабет), при генетических нарушениях, злокачественных обра­зованиях, болезнях опорно-двигательного аппа­рата, при тяжелых травмах. Причем возможно, что в недалеком будущем, с развитием новых клеточных технологий, сфера применения стволовых клеток может очень расшириться.

- А за этот срок работы со стволовыми клетками уже вы­явлены негативные тенденции при их использовании для лече­ния?

Пока мы не сталкивались с этим, видели только положительный результат, исследования продолжаются. Некоторые ученые говорят, что может пойти не та дифференциация трансплантируемой стволовой клет­ки в организме: стволовая клетка дифференцируется на 200 видов кле­ток, которые существуют в нашем организме. Это и костные, и сердеч­ные, и нервные, и мышечные, и все другие. Эта клетка настолько уни­кальна, что позволяет сформировать из себя все что угодно. Наша зада­ча - добиться того, чтобы давать этим стволовым клеткам определен­ный импульс, который бы позволял дифференцироваться в ту ткань, ко­торую мы хотим. Пока мы это не можем, пока мы их только вводим в ор­ганизм, и организм сам дает импульс для дифференциации. Если, напри­мер, случился инсульт, то мы вводим клетки в область мозга, где и прои­зошло кровоизлияние, и уже там эти клетки начинают преобразовывать­ся в нервные клетки. Если случился инфаркт, то мы вводим их или внут­ривенно, или непосредственно в сердце - они начинают формировать­ся и заменять кардиомиоциты 3 .

- А что вы можете сказать об исследовании эмбриональ­ных клеток, которые тоже относят к стволовым?

Эмбриональные клетки - это благодатный объект для науки, их потенциал огромен. Но вопрос их применения сегодня даже не стоит. И дело здесь даже не столько в морально-этическом аспекте, связанном с использованием абортивного материала, о котором много говорят, особенно на Западе. Дело в том, что ме­ханизм их дифференциации еще четко не выявлен, по­этому сначала их надо хорошо изучить, а потом думать о применении: эмбриональными клетками занимаются очень серьезно, но использовать их можно будет, может быть, через 30-40 лет, когда научатся ими управлять, а эта проблема настолько же глобальна, как и пробле­ма роста раковых клеток. В принципе, механизмы функ­ционирования у них практически одинаковы.

- Давайте вернемся к вопросу об использо­вании замороженных стволовых клеток други­ми членами семьи. Какова вероятность того, что хранящиеся в банке стволовые клетки мо­гут им пригодиться?

Высокий шанс оказаться иммунологически совместимыми есть у кровных родственников, т.е. у матери, братьев, сестер ребенка, чьи клетки хранятся в банке стволовых клеток. Тогда ребенок выступает донором 4 , а иммунологически совместимые с ним родственни­ки - реципиентами 5 . Наибольшие шансы оказаться совместимыми имеют близнецы и дети одних многодетных родителей.

- Эта вероятность имеет статистическое подтвержде­ние?

Статистически она относительно невысока: в случае злокачест­венных заболеваний - от 1 случая на 500 человек до 1 на 5000.

- На чем основана совместимость клеток донора и реципи­ента? Что может произойти, если стволовые клетки не по­дойдут пациенту?

Успех трансплантации определяется точностью подбора совмес­тимой пары «донор-реципиент» по определенным антигенам (белкам) так называемого комплекса гистосовместимости, т.е. свойством органа, ткани или клеток донора не отторгаться организмом реципиента. Преж­де чем производить трансплантацию, нужно провести так называемое HLA-типирование - по нему определяется степень совместимости. В идеальном варианте - это 6 совпадений из 6 возможных (3 гена ребе­нок наследует от матери, 3 - от отца). Если несовпадений - больше трех, то трансплантация не будет успешной ни при каких условиях. Либо трансплантат будет отторгнут иммунной системой реципиента, либо, что еще хуже, разовьется болезнь «трансплантант против хозяина» 6 .

- На Западе активно обсуждается возникшая в связи с развитием новых клеточных технологий проблема - выращи­вание детей «по заказу», т.е. когда в семье есть больной ребе­нок, родители рожают другого, чтобы использовать стволо­вые клетки для лечения больного. Как вы можете прокоммен­тировать эту проблему?

Это пока единичные случаи. Но они оправданы. Потому что в пер­вый раз, когда мать рожала, не было возможности сохранить клетки, а теперь ее ребенку нужна помощь.

- Итак, давайте теперь обратимся к насущному вопросу о том, когда и как именно происходит забор и хранение стволо­вых клеток из пуповины?

Процедура забора пуповинной крови занимает всего несколько минут и абсолютно безопасна как для матери, так и для ребенка. Она никак не влияет на течение родов и может проводиться как в ходе нормальных родов, так и при кесаревом сечении.

Происходит это так: рождается ребенок, пересекается пу­повина, и пуповинная кровь собирается специально обученным персоналом родового отделения в стерильный контейнер, со­держащий раствор антикоагулянта 3 . Далее собранная пупо­винная кровь незамедлительно доставляется в специализиро­ванную лабораторию, где из нее выделяются стволовые клет­ки. С момента получения пуповинной крови до начала выделе­ния стволовых клеток может пройти не более 12-24 часов (при условии правильного хранения). В последующие 24 часа количество жизнеспособных стволовых клеток значительно уменьшается.

- Какая доза крови берется?

Все, что удается собрать при родах, - это от 40 до 150 мл. Средний объем пуповинной крови, который удается собрать, - примерно 80-85 мл. Бывает и больше: 120, 130, 140 мл. Это уже за­висит от особенностей мамы, от срока беременности, от веса ребенка - такие чисто биологические параметры. Чем больше крови, тем больше клеток будет выделено, соответственно, трансплантация может быть вы­полнена более результативно. Дело в том, что трансплантация проводит­ся из расчета числа клеток к весу пациента. Соответственно, чем боль­ше клеток мы сохраним, тем старше будет возраст и больше вес паци­ента, которому они могут быть успешно трансплантированы. Если мы собрали 100-120 мл, то этих клеток заведомо достаточно для тран­сплантации взрослому.

- Можно ли оговорить с роженицей, что представитель «КриоЦентра» выедет с контейнером в выбранный ею роддом?

Заготовка пуповинной крови происходит пока только в родовом отделении Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН, но в ближайшее время с нашим банком будет сотрудничать еще несколько родильных домов. На первых порах мы готовы направлять для забора крови наших обученных сотрудников, но лучше, если это будут уметь делать акушеры и медсестры на местах.

- Где и как происходит выделение из пуповинной крови стволовых клеток? Зачем их выделять и почему просто нельзя хранить собранную кровь?

Дело в том, что содержание стволовых клеток в пуповинной крови относительно невелико - менее 1% от всех лейкоцитов. Эрит­роциты и прочие элементы крови являются ненужным балластом. В процессе выделения стволовых клеток кровь подвергается поэтапной обработке, в результате чего происходит освобождение от избытка плазмы, практически всех эритроцитов и большинства зрелых лейко­цитов. Выделенные стволовые клетки находятся в аутологичной 8 плазме, так что нет никаких чужеродных для человеческого организма компонентов. Данный способ является дорогим, но наиболее эффек­тивным.

Выделение стволовых клеток и их анализ проводятся с применени­ем только одноразовых расходных материалов, в специальном «чис­том» помещении, оснащенном подачей стерильного воздуха. Это единственное место, где образец крови контактирует с внешней сре­дой. Во всех остальных случаях он находится в герметично закрытой посуде. В лабораториях соблюдены все так называемые технические условия международного стандарта GMP.

- Какие делаются анализы?

Во-первых, определяется количество клеток (мы их считаем буквально поштучно); во-вторых, - группа крови, резус-фактор новорожденного, даже если это было сделано в родблоке - мы повто­ряем, чтобы не было ошибок. Здесь же происходит определение жиз­неспособности клеток перед замораживанием (мы должны убедиться, что после выделения они все живые), а также проверка на стериль­ность в плане бактериальной и грибковой инфекции. Ни один образец стволовых клеток не будет направлен на хранение вместе с остальны­ми, не будучи признанным «чистым» в отношении опасных инфекций. Время, необходимое для получения результатов тестирования, образ­цы стволовых клеток проводят на «карантинном» хранении, исклю­чающем контакт с другими пробами.

- Какова технология хранения выделенных клеток?

Стволовые клетки расфасованы в несколько ампул - в случае необходимости это позволит использовать нужное на данный момент количество клеток, а оставшиеся сохранить для будущих нужд, учи­тывая быстрое развитие новых клеточных технологий. Каждая ампу­ла с клетками помещается в герметично запаянный пластиковый пе­нал, обеспечивающий дополнительную защиту содержимого и марки­ровки. Вместе с основными хранятся маленькие ампулы-спутники, которые в случае необходимости извлекаются перед началом тран­сплантации; и по ним проверяются все нужные параметры. Клетки замораживаются в специальных установках - программных замораживателях, куда порционно подается жидкий азот и где температура плавно понижается с комнатной до -90 °С, по специальной програм­ме без колебания температуры. После этого их уже можно перекла­дывать в жидкий азот. Замораживатель параллельно рисует график снижения температуры, что является еще одним подтверждением правильности этой процедуры. Этот график впоследствии хранится в папке со всеми данными, характеризующими образец клеток. И потом клетки хранятся в сейфе-хранилище в жидком азоте при темпе­ратуре -196 °С - именно при такой температуре они сохраняют жиз­неспособность и биологическую активность на протяжении неограни­ченного времени.

- Сколько лет хранятся клетки?

Практически неограниченное время. Наш договор рассчитан на 15 лет - это срок, определенный большинством существующих в мире банков стволовых клеток, но при желании его можно продле­вать.

- Как отреагирует хранилище клеток на внезапное отк­лючение электроэнергии, разного рода аварии и техногенные катастрофы?

Чтобы построить такое помещение в нашем Центре, было затрачено очень много средств. Это сейф из металла, и если везде будет бушевать пожар, по техническим требованиям сейф и распо­ложенное в нем современное оборудование выдержат его в течение нескольких часов, образцам ничего не угрожает. При отключении электричества он автономно будет хранить образцы крови, так как здесь стоит электрогенератор.

- Проходит ли беременная женщина, решившая сохра­нить пуповинную кровь своего ребенка, какие-то обследования и зачем?

Если кровь ма­тери инфицирована, то она может инфициро­вать пуповинную кровь, поэтому при­мерно за 30 дней до предполагаемого вре­мени родов или непос­редственно перед ро­дами кровь матери должна быть дополнительно обследована на наличие возбудителей вирусных и бактериаль­ных инфекций, опасных для здоровья: ВИЧ, гепатитов, цитомегаловируса, токсоплазмоза, сифилиса, вируса Т-клеточного лейкоза челове­ка. Если анализы отрицательные, считается, что за месяц до родов мать уже практически не может инфицироваться СПИДом, гепати­том, но полученную во время родов пуповинную кровь мы проверяем, анализы повторяем, и, пока мы не убедимся в их чистоте, клетки у нас стоят на карантине.

- В каких случаях пуповинная кровь не может быть ис­пользована для трансплантации?

Есть абсолютные и относительные противопоказания. Абсо­лютными противопоказаниями являются: положительные результаты тестирования в отношении хотя бы одного из перечисленных заболе­ваний у матери; бактериальное или грибковое инфицирование пуповинной крови или выделенных стволовых клеток.

Относительные: низкое содержание стволовых клеток ввиду малого объема полученной пуповинной крови или её индивидуальных осо­бенностей.

- Во сколько обойдется процедура забора крови и ее хранение, а также предварительные анализы матери и тестирование полученного клеточного материала?

В формировании цены есть несколько составляющих: административные расходы (пакет документов, индивидуальный набор для забора пуповинной крови, получение пуповин­ной крови и т.п.), лабораторные анализы крови матери и пуповинной крови, выделение и хра­нение стволовых клеток, включая тесты и за­мораживание, всего получается 2350 евро. Хранение клеток в течение каждого последую­щего года - еще 100 евро. Если пуповинная кровь оказывается инфицированной и непри­годной для дальнейшего использования, удер­живается стоимость медицинских препаратов, и оговоренная сумма возвращается пациенту. Но все равно стоимость затрат на выделение и хранение аутологичных стволовых клеток из пуповинной крови в десятки раз меньше, чем поиск и приобретение аналогичных, но донорс­ких (аллогенных) - стоимость одного образца пуповинной крови, предоставляемого между­народными банками-регистрами для тран­сплантации, - от 18 000 до 25 000 долларов.

С Владимиром Кулаковым беседовала Ольга Молдавская.

1 Иммуногенность - способность вызывать некоторые осложнения, в т. ч. болезнь «трансплантат против хозяина»,

2 Алогенные - органы, ткани или клетки, происходящие из организма, отличного от организма пациента.

3 Кардиомиоциты - клетки сердечной мышцы, за счет которых сердце сокраща­ется.

4 Донор - пациент, предоставляющий свои органы, ткани или клетки для тран­сплантации.

5 Реципиент - пациент, которому производится трансплантация.

6 Болезнь «трансплантат против хозяина» - это тяжелое, иногда несовместимое с жизнью заболевание, являющееся осложнением трансплантации. Связано с имму­нологической несовместимостью тканей донора и реципиента. Клетки иммунной системы, образовавшиеся из трансплантированных стволовых клеток донора, восп­ринимают ослабленный организм реципиента в качестве «чужака» и начинают с ним бороться.